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大鼠感染模型構建

大鼠感染模型構建

簡要描述:
大鼠感染模型構建:大鼠感染模型是研究病原體致病機制、宿主免疫反應及藥物疫苗評價的重要手段

更新時間:2025-06-24

訪問量:156

廠商性質:其他

一、大鼠感染模型構建實驗設計

  1. 明確研究目的

    • 確定研究目標(如病原體致病性、免疫應答、治療評估等)。

    • 選擇適合的病原體(病毒、細菌、寄生蟲、真菌等)。

  2. 選擇大鼠品系和年齡

    • 品系:SD(Sprague-Dawley)、Wistar大鼠常用;免疫研究可選LEWIS或F344等近交系。

    • 年齡/體重:根據(jù)實驗需求選擇幼鼠(免疫發(fā)育)、成年鼠(標準模型)或老年鼠(衰老免疫研究)。

    • SPF級動物:確保無特定病原體干擾實驗結果。

  3. 病原體選擇與制備

    • 確定病原體株(如流感病毒H1N1、結核分枝桿菌H37Rv等)。

    • 測定病原體滴度(如病毒TCID50、細菌CFU),確保接種劑量準確。


二、大鼠感染模型構建感染途徑與方法

根據(jù)病原體特性選擇感染方式:

  1. 呼吸道感染(如流感病毒、結核桿菌)

    • 鼻內滴注:麻醉后滴入病原體懸液。

    • 氣溶膠暴露:使用霧化裝置模擬自然感染。

  2. 消化道感染(如腸道病原體)

    • 灌胃:直接注入胃內。

    • 口服感染:通過飼料或飲水(需控制攝入量)。

  3. 注射感染

    • 腹腔注射(IP):適用于全身性感染模型(如敗血癥)。

    • 靜脈注射(IV):用于血液或器官靶向感染。

    • 皮下/肌肉注射:局部感染或疫苗研究。

  4. 其他途徑

    • 創(chuàng)傷感染(皮膚傷口模型)、顱內注射(神經(jīng)感染模型)等。


三、感染劑量與監(jiān)測

  1. 預實驗確定劑量

    • 通過梯度劑量測試,選擇能引起典型癥狀但不致死的中等劑量(如LD50的10-50%)。

    • 參考文獻或預實驗數(shù)據(jù)優(yōu)化。

  2. 感染后監(jiān)測

    • 臨床癥狀:體重、活動度、毛發(fā)狀態(tài)、呼吸頻率等。

    • 病原學檢測:qPCR、培養(yǎng)法檢測組織載量(如肺、肝、脾)。

    • 免疫指標:ELISA檢測血清抗體/細胞因子,流式細胞術分析免疫細胞亞群。

    • 病理學:解剖觀察病變,HE染色分析組織損傷。


四、對照設置

  1. 陰性對照:PBS或培養(yǎng)基處理的假感染組。

  2. 陽性對照:已知致病株或標準治療藥物組(如抗生素治療組)。

  3. 空白對照:未處理健康大鼠。


五、注意事項

  1. 生物安全

    • 根據(jù)病原體等級(BSL-1/2/3)選擇對應實驗室,遵守防護規(guī)范。

    • 廢棄物需高壓滅菌處理。

  2. 倫理審批

    • 實驗方案需通過動物倫理委員會審查(遵循3R原則)。

  3. 標準化操作

    • 統(tǒng)一感染時間、環(huán)境條件(溫度、濕度、光照周期)。

    • 避免應激(如頻繁抓取)。

  4. 數(shù)據(jù)分析

    • 記錄感染后時間點的動態(tài)變化(如病毒載量峰值、抗體產(chǎn)生時間)。

    • 使用統(tǒng)計方法(如t檢驗、ANOVA)比較組間差異。


六、常見問題與解決

  • 感染失敗:檢查病原體活性、接種劑量或操作誤差。

  • 高死亡率:降低接種劑量或調整大鼠品系(如改用免疫缺陷鼠)。

  • 個體差異:增加樣本量(每組至少6-8只)。


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